目的 利用在大肠杆菌体系中诱导表达的人源NMNAT1蛋白筛选其抑制剂，寻找治疗肿瘤的新药物。方法 利用酶切连接体系将人源NMNAT1插入pET21b(+)载体，将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)菌株过表达蛋白，对重组蛋白进行纯Blasticidin S化，通过3段式酶联荧光法在2 280种天然化合物中筛选具有抑制NMNAT1活性的化合物，并在细胞水平验证其对肿瘤细胞的杀伤效果。结果 纯化得到较高纯度和活性的人重组NMNAT1蛋白；什么筛选出6种高效的NMNAT1抑制剂；其中一种抑制剂fraxeStem Cell Compound Librarytin能降低乳腺癌细胞NAD~+含量，促进细胞凋亡，与敲低NMNAT1后转录组测序(RNA-seq)分析得出的细胞凋亡通路增强一致。结论 Fraxetin是NMNAT1强效抑制剂，能够促进乳腺癌细胞凋亡。