通过双荧光素酶法检测GAS5与miR-221-3p的靶向结合。通过不同剂量甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine, 5-Aza-dC)的加入了解GAS5启动子区域的甲基化状态。结果 GAS5在肝癌细胞株和肝癌组织中表达显著下调。过表达GAS5明显抑制肝癌细胞增殖Torin 1 IC50、迁移、侵袭及克隆形成。GAS5存在与miR-221-3p的互补结合位点。随着5-Aza-dC浓度的增加,GAS5相对表达量呈现显著上调。结论 GAS5在肝癌组织和细胞系中的表达显著下调,可能与其CpG岛甲基化有关。GAS5可作为分子海绵吸附miR-221-3p抑制肝癌细胞增殖。
抑制剂 目的基于生物信息学分析方法,获取与正常肝组织具有表达差异、且与肝癌患者生存、病理参数密切相关的肝癌基因。方法通过GEO数据库获取三组肝癌芯片表达谱,利用GEO2R鉴定肝癌组织与正常肝组织具有表达差异的基因;应用DAVID数据库,富集差异表达基因;使用STRING数据库及ScytoscIACS-10759细胞系ape软件,构建核心差异基因的蛋白质互作网络(protein-protein interaction,PPI),并通过UCSC Cancer Genomics Browser网站在TCGA数据库中验证关键差异基因在肝癌中的表达情况;基于Kaplan Meier-Plotter及UALCAN在线分析工具,挖掘关键基因在肝癌组织中的mRNA表达与临床病理参数的关系。