细胞实验1.Transwell共培养巨噬细胞(Raw264.7)与足细胞(MPC),取Raw264.7巨噬细胞以2×10~5,4×10~5,8×10~5/孔浓度接种于6孔板Transwell的上室滤膜上培养并同步化,同时取MPC足细胞以4×10~5/孔浓度接种于6孔板培养并同步化,随后将上Danusertib供应商述含有Raw264.7巨噬细胞的上室放入含有MPC足细胞的六孔板中培养,在此共培养体系中加或不加25 mM高葡萄糖(High glucose,HG)或者25mM甘露醇(Mannitol,Man)培养48h。2.首先体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,将其分为三组AZD3965正常葡萄糖组(NC)、甘露糖组(Man)、高葡萄糖组(HG),24h后PBS清洗后予以正常培养基培养24h后收集上述NC组巨噬细胞上清液(NC-CM)和HG组巨噬细胞上清液(HG-CM)。采用Western blot和免疫荧光染色检测M1型巨噬细胞标志物(induLiproxstatin-1说明书cible Nitric oxide synthase,iNOS)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis facto-α,TNF-α)和M2型巨噬细胞标志物(Mannose receptor,MR)表达,酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)检测巨噬细胞上清液TNF-α水平。