未被修饰的RSA对ROS的产生无显著影响(P>0.05)。使用NADPH氧化酶抑制剂DPI,apocynin以及ROS清除剂与IEC-6细胞预孵育显著降低了 AOPPs提升IEC-6细胞ROS的水平(和AOPPs组比,P<0.05)。5. AOPPs诱导IEC-6细胞内JNK磷酸化WB实验显示,AOPPs刺激IEC-6细胞30min后,JNK发生明显的磷LXH254细胞系酸化,磷酸化效应可持续至3h (差异有统计学意义,P<0.01)。而空白对照组及未修饰RSA组无此效应。6.AOPPs通过NADPH氧化酶-ROS-JNK途径上调PARP-1的表达经典的依赖caspase-3途径与新近发现的由PARP-1介导的非依赖性caspase-3途径是炎症损伤、氧化应激相关的凋亡及坏死下游转导通路。前者以CHIR-99021花费caspase-3前体(35Kda)降解为裂开的caspase-3 (17Kda和19Kda)为特征。后者以PAR形成、NAD+消耗、胞浆AIF向胞核转位为主要特征。为了探讨AOPPs诱导IEC-6细胞凋亡的下游信号通路,我们采用wesetem检测了 AOPP-RSA刺激前后 procaspase-3、cleaved caspaLY2157299半抑制浓度se-3、PAR及 PARP-1 的表达变化。结果显示,113Kda的全长PARP-1在200μg/mL的AOPPs-RSA刺激后1h即增加,6h达顶峰,24h仍处于高水平,同时伴随着85Kda的PARP-1断裂带出现。PAR蛋白表达的变化与PARP-1基本一致。采用核浆分离提取,我们发现AOPPs刺激后,IEC-6细胞核中AIF显著增加。而伴随着PARP-1的增加与PAR的形成,细胞内NAD+的浓度下降。