方法采用蛋白酶体抑制剂MG132(2μmol/L和5μmol/L)处理ECV-304细胞;流式细胞术检测细胞凋亡率;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测UPP相关基因E1、E2、E3和凋亡相关基因caspase-3的转录水平;免疫细胞化学检测细胞caspase-3蛋白表达。结果MG132处理组细胞的凋亡率明显增加;细胞内UPP相关基因E1、E2、E3 mRN抑制剂A表达下降,而凋亡相关基因caspase-3 mRNA表达上调;细胞内caspase-3蛋白表达水平升高。结论蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导ECV-304细胞凋亡,其机制可能是MG132抑制UPP活性,使细胞内caspase-3蛋白降解减少,同时上调caspase-3基因转录而促进细胞凋亡。”
“为建立简单快速的地中海贫血(简称地贫NVP-BKM120说明书)诊断方法,探讨了傅里叶红外光谱结合水平衰减全反射(FTIR-HATR)技术用于β-地贫患者的检测及其分子机制。检测了68份正常与37份β-重型地贫患者样品,并在群体水平上分析了两者光谱差异变化规律。结果显示:(1)由于血红蛋白量的减少,β-地贫组的光谱强度显著低于正常组;(2)在1750～1500cm-1区间,表征蛋白二级结构的165获悉更多2,1638和1628cm-1在β-地贫中有明显降低,而在1682cm-1处略微增强;(3)在1350～1500cm-1区间,表征磷脂CH3/CH2的1440,1453,1479cm-1及CO—O—C的1172和1161cm-1吸收峰在β-地贫中显著减少;而在1000～1200cm-1区间,表征碳水化合物C—O的1150cm-1,2,3-二磷酸甘油酸(DPG)或ATP中OPO的1081和1053cm-1吸收峰显著升高。