方法采用琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;RT-PCR和DNA测序法检测胞内表皮生长因子受体EGFR的mRNA表达及基因变化;蛋白印迹法检测AKT,p-AKT,CyclinD1及CDK-4的蛋白表达水平。结果EGFR抑制剂AG1478和AKT抑制剂PHZ1023均可阻断UVA引起的细胞凋亡;1.42～5.68mmol.L-1范围内的PEverolimus购买CF可抑制UVA辐射后细胞内EGFR的表达量。预先加入AG1478和PHZ1023则分别抑制UVA引起的AKT及CyclinD1,CDK-4蛋白水平的表达。结论PCF可以通过阻断EGFR-CDK-4通路来抑制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡。”
“目的研究葡萄糖甘油二脂(Glucosyldiacylgl点击此处ycerol,GDG自马尾藻分离提取)促进大白鼠肺血栓溶解及其作用机制。方法用荧光异硫氰酸异构体Ⅰ(Fluorescein isothiocyanate isomerⅠ,略写为FITC)标记纤维蛋白以建立肺血栓动物模型,GDG尾静脉注射,观察其肺血栓溶解的药理作用。通过建立的体外纤溶反应体系,研究GDGBcl-2 inhibitor对纤溶酶原和单链尿激酶型纤溶酶原激活剂体活性的影响,并且用圆二色谱进一步研究GDG对单链尿激酶型纤溶酶原激活剂构象的影响。结果GDG具有促进肺血栓溶解的作用;建立体外纤溶反应体系,发现GDG不能促使纤溶酶原和尿激酶型纤溶酶原激活剂分别直接转化为纤溶酶和尿激酶;用圆二色谱研究发现,GDG使单链尿激酶型纤溶酶原激活剂在208nm处的负峰向长波方向移动,并且α-螺旋结构减少β-折叠结构增加。