利用qRT-PCR、Western blot和免疫组化方法检测肝内HBx基因的mRNA和蛋白表达情况。建模后180 d检测小鼠肝组织的细胞周期调控因子CDK4和CyclinD1,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-10(IL-10)的mRNA和蛋白表达水平以及ERK1/2信号转导通路成员ERK1/2和MEK1/2的蛋白表达水平。HE染色观察HBx基因是selleck screening library否引起肝组织病理变化。结果稳定表达HBx基因的小鼠模型构建成功。与生理盐水组和EGFP-14-19组相比,小鼠肝脏组织在转入HBx 180d后HBx显著上调CDK4,CyclinD1,TNF-α的mRNA表达水平(P<0.01),同时显著上调CDK4,CyclinD1,TNF-α蛋白水平;HBx显著下调IL-10的mRNA和蛋白表ARN-509达水平(P<0.05)。HBx显著激活ERK1/2信号转导通路。给予ERK1/2信号通路抑制剂U0126后,与对照组相比,实验组CDK4和CyclinD1,TNF-α的mRNA表达水平显著下调(P<0.05);同时,CDK4和CyclinD1,TNF-α蛋白水平显著下调, IL-10的mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.01)selleck Akt 抑制剂。HE染色结果显示小鼠肝脏组织在转入HBx 180d后肝脏组织明显病变。结论 HBx通过激活ERK1/2信号通路促进肝细胞增殖,与肝脏炎症有关。
目的 探讨榄香烯对人胶质瘤U251细胞的放射增敏机制。方法 以U251细胞系为离体胶质瘤模型,用不同浓度榄香烯和不同放射剂量分别处理U251细胞,采用MTT实验检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,Western blot检测相关蛋白的表达水平。